志賀氏菌核酸PCR檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：48T/盒；

 保存條件：避光 -20度 保存。

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志賀氏菌核酸PCR檢測(cè)試劑盒

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1.稱羅50-100mg經(jīng)液氮研磨成粉末狀嘅真菌樣品至1. 5ml離心理，即刻加500ul RB/2-Me，劇烈渦旋。
2.室溫14000×g離心5min，因住轉(zhuǎn)移上清至勻漿柱中。14000×g離心2min。
3.轉(zhuǎn)移有冇收集理中嘅上清（注意唔好食到沉淀）至新離心理，加0. 5倍體積無(wú)水乙醇或者等體積嘅7 0 %乙醇，嗍打或者渦旋撈勻。（一般可轉(zhuǎn)移450ul嘅上清液，可加225ul無(wú)水乙醇）。
4.將RNA柱套喺新有冇收集理，轉(zhuǎn)移撈液至RNA條。室溫10000×g離心30-60秒，棄去濾液。如果出現(xiàn)塞柱現(xiàn)象，提高離心速度至14，000xg。
5.（可選）膜上DNase消化：
1）加300ul RNA Wash Buffer I至碌柱中，跟住上柱條件離心，棄濾液；
2）配制DNase消化液（Digestion Buffer，73.5ul；RNase-Free DNase I，1.5ul），撈勻。
3）將上述消化液轉(zhuǎn)移到條膜嘅正中央，唔好將消化液轉(zhuǎn)移到條內(nèi)壁。
4）室溫靜置15分鐘。
6.加400ul RNA Wash Buffer I至碌柱中，跟住以上條件離心，棄去濾液同有冇收集理。
7.將條套喺新有冇收集理，加500ul RNA Wash Buffer II至碌柱，跟住以上條件離心棄去濾液。
8.將條套回收集理，加500ul RNA Wash Buffer II至碌柱，跟住以上條件離心棄去濾液。
9. 10000xg離心得閑柱2min以上揈做條基質(zhì)。
注意：唔好忽略此步――呢對(duì)喺條上除去乙醇至關(guān)重要。
10.將條扮喺干凈嘅1.5ml離心理上，加30- 50ul DEPC Water到條基質(zhì)上室溫靜置2min。10000xg離心2min洗脫出RNA。